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Western Blot 属于经验依赖性的多步骤实验,结果的优劣受到多个因素的影响,传统的手工操作容易引入误差,
难以保证重复性。BlotCyclerTM 是全自动化的Western Blot 洗液工作站,自动化完成封闭、孵育、清洗和一抗回收的
一系列工作,很好地解放您的劳动力。
更为重要和有意义的是:**的流体清洗可以减少二抗在膜上的附着,降低背景,提高信噪比和相对灵敏度;
自动化的操作流程避免了手工操作的误差,保证了批次内和批次间实验的重复性;高通量操作和多条件的设定
可以辅助您优化Western Blot 实验的条件,例如合适的抗体浓度。
简易的操作步骤
加入洗涤缓冲液,和6种不同一抗和二抗 | 放置好一抗回收管将转印膜放入样品盘并加入封闭液 |
编辑程序并运行
自动化操作,可以获得更好的重复性
自动化的过程相对于手工操作可以把误差降至*低,保证了重复性。
如上图所示,使用BlotCyclerTM 平行处理5 张膜,检测Tubulin 和IL-2蛋白,条带信号使用分子量标准进行均一化处理,
目的条带的相对信号值在5 次实验中的偏差较小。由此可见,BlotCyclerTM 的自动化操作能够保证较好的重复性
**的流体技术降低背景,提高信噪比和相对灵敏度
通过一系列对比实验发现,使用BlotCyclerTM 进行Western Blot 可以获得更低的背景值,目的蛋白质条带更加清晰锐利。
如上图所示,泳道1、2、3 分别上样Hela 细胞的裂解液、重组的人IL-2 蛋白和前两者的混合物,加入小鼠源Tubulin
和兔源IL-2 的一抗,以及DyLight549 标记的抗鼠二抗和DyLight649 标记的抗兔二抗。
设立4 组平行实验:BlotCyclerTM 4℃环境操作,手工4℃环境操作,BlotCyclerTM 室温环境操作,手工室温环境操作,
膜信号检测使用相应的荧光成像设备。不同组内蛋白条带的信号通过分子量标准品进行均一化处理。
结果发现,使用BlotCyclerTM 操作所获得的IL-2 和Tubulin 的相对信号值均高于手工操作,不论是4℃还是室温环境。
由此可见,BlotCyclerTM 的自动化操作确实能够降低背景值,提高信噪比和相对灵敏度。
丰富的程序编写功能,人性化的设计理念。
灵活设定封闭、孵育和洗涤的时间,以及洗涤的循环数。 左右两侧的样品盘可以设定不同的程序,独立控制。
BlotCycler 特点总结
? 完全自动化:填充试剂后无需人工操作;
? **的流体技术驱动液体,无需真空泵或空气压缩机等辅助设备;
? 通量灵活:6 个样品盘(每侧3 个),每个样品盘可使用不同的一抗/ 二抗,*多可一次处理12 张膜;
? 可选配不同大小的样品盘:10 × 8 cm,15 × 10 cm;
? 自动回收一抗,可以反复使用10 次;
? 程序结束后可自动完成管路清洗,去除残余试剂;
? 触摸屏程序编写,可设定多至100 个步骤,每个步骤的参数可调;
? 洗涤缓冲液可保留在样品盘内,保持膜的湿润;
? 开放的系统设计,无需专用的试剂耗材;
? 关键步骤和程序结束具有声音提示功能;
? 结构紧凑,占用空间小,仅30.48 × 30.48 cm。
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